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Reconstituir um frasco de retatrutida liofilizada, passo a passo

A retatrutida para investigação chega em pó liofilizado. Antes de qualquer ensaio in vitro é preciso pô-la em solução, com limpeza, calma e registo de tudo o que se faz.

Atualizado a Leitura: 3 min

Liofilizar é secar a baixa temperatura e sob vácuo. O pó resultante é estável, mas frágil quando volta ao estado líquido. Os passos abaixo seguem as boas práticas gerais para péptidos e aplicam-se à retatrutida.

Material necessário

  • Frasco de retatrutida liofilizada à temperatura ambiente (retirado do frio 15 a 20 minutos antes).
  • Diluente estéril: água bacteriostática (água estéril com 0,9 % de álcool benzílico) se a solução for usada várias vezes; água estéril para injetáveis se for usada de uma só vez.
  • Seringa graduada estéril de 1 ou 3 mL e agulha de aspiração.
  • Compressas com álcool isopropílico a 70 %.
  • Etiquetas, marcador permanente e caderno de laboratório.
  • Luvas de nitrilo e bancada desinfetada.

O protocolo

  1. Verificar o frasco. Confirme o número de lote, a quantidade indicada e a integridade da cápsula. O pó deve formar uma pastilha ou depósito branco, sem humidade nem cor.
  2. Desinfetar. Retire a cápsula de plástico e passe álcool na rolha do frasco e na do diluente. Deixe secar alguns segundos.
  3. Aspirar o diluente. Retire o volume escolhido (veja a tabela) e elimine as bolhas de ar.
  4. Injetar devagar, pela parede. Incline o frasco e deixe o líquido escorrer pelo vidro em vez de cair sobre o pó. Um jato forte faz espuma e pode degradar parte do péptido.
  5. Dissolver sem agitar. Role o frasco entre os dedos ou rode-o lentamente. A dissolução costuma levar um a dois minutos; se ficarem partículas, deixe repousar no frigorífico alguns minutos e repita.
  6. Inspecionar. A solução deve ser límpida e incolor. Uma solução turva, com filamentos ou colorida não deve ser usada.
  7. Etiquetar e registar. Escreva no frasco a concentração (mg/mL), o diluente, a data e as suas iniciais, e repita a informação no caderno com o número de lote.
  8. Refrigerar. Coloque a solução de imediato entre 2 e 8 °C, ao abrigo da luz (veja conservação).

Tabela de diluição

A concentração é simplesmente a massa de péptido a dividir pelo volume de diluente. Numa seringa de insulina U-100, 1 mL corresponde a 100 unidades.

Valores arredondados. Os frascos maiores seguem a mesma regra.
FrascoDiluenteConcentraçãoVolume para 1 mgUnidades U-100
5 mg1 mL5 mg/mL0,20 mL20
5 mg2 mL2,5 mg/mL0,40 mL40
10 mg1 mL10 mg/mL0,10 mL10
10 mg2 mL5 mg/mL0,20 mL20
15 mg3 mL5 mg/mL0,20 mL20
20 mg2 mL10 mg/mL0,10 mL10
20 mg4 mL5 mg/mL0,20 mL20
30 mg3 mL10 mg/mL0,10 mL10

Calculadora de concentração

Concentração: 5 mg/mL · volume para 1 mg: 0,2 mL (20 unidades numa seringa U-100).

A calculadora funciona no seu navegador e não envia dados. Serve para conferir contas de laboratório, não para calcular doses humanas.

Erros frequentes

ErroConsequênciaComo evitar
Agitar o frascoEspuma, possível agregaçãoRodar suavemente
Diluente diretamente sobre o póDegradação localEscorrer pela parede
Volume demasiado pequenoMedições difíceis e imprecisasEscolher volumes que deem valores redondos
Não etiquetarConfusão de concentrações e lotesEtiqueta e caderno no próprio momento

Se ainda não escolheu o formato, a página de retatrutide para investigação lista as quantidades por frasco e as condições de armazenamento indicadas pelo fornecedor.